TINCIONES

HEMATOXILINA - EOSINA

1. Las muestras se dejan en la estufa, por lo menos 10 minutos a 60ºC o toda la noche a 37ºC (desparafinación).
2. Xilol, 3 pasos de 5 a 10 minutos (final desparafinación).
3. Etanol, por lo menos 3 pasos, habitualmente 96º, 80º, 70º, de 3 a 5 minutos. Acabar con un paso de agua (hidratación).
4. La hematoxilina se debe filtrar antes de empezar.
5. Hematoxilina durante 3-5 minutos.
6. Llevar la cubeta a la pila.
7. Lavar la muestra en una cubeta con agua corriente de forma que rebose y eliminar el exceso de colorante.
8. La muestra se sumerge y se saca rápidamente en una cubeta con alcohol clorhídrico (0.5% de HCl en etanol absoluto) varias veces, para eliminar el exceso de coloración en la muestra (diferenciación).
9. Se neutraliza el ácido sumergiendo la muestra en agua corriente durante 2 minutos.
10. Lavar con agua corriente durante varios minutos. Pasar por agua destilada antes de seguir.
11. Sumergir la muestra en Eosina durante 3-5 minutos.
12. Baño rápido con agua.
13. Etanol, por lo menos 3 pasos, habitualmente 70º, 80º, 96º, de 3 a 5 minutos. Acabar con 3 pases de 100% (deshidratación).
14. Se acaba en xilol, en 2 o 3 cubetas, de 30 segundos a 5 minutos.
15. Montar de manera habitual.

  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

TRICRÓMICO DE MASSON

Protocolo:

1. Las muestras se dejan en la estufa, por lo menos 10 minutos a 60ºC o toda la noche a 37ºC (desparafinación).
2. Xilol, 3 pasos de 5 a 10 minutos (final desparafinación).
3. Etanol, por lo menos 3 pasos, habitualmente 96º, 80º, 70º, de 3 a 5 minutos. Acabar con un paso de agua (hidratación).
4. La hematoxilina se debe filtrar antes de empezar.
5. Hematoxilina de Harris durante 3-5 minutos.
6. Llevar la cubeta a la pila.
7. Lavar la muestra en una cubeta con agua corriente de forma que rebose y eliminar el exceso de colorante.
8. Baño rápido con agua acética (1%).
9. Baño rápido con agua corriente.
10. Sumergir en Fucsina de Ponceau durante 5 minutos.
11. Baño rápido con agua corriente.
12. Baño rápido con agua acética 1%.
13. Sumergir en Orange G o Ácido Fosfomolibdico 1% (sale mejor con el ácido fosfomolibdico 1%) durante 5 minutos.
14. Baño rápido con agua acética 1%.
15. Sumergir en Azul de Anilina durante 10 minutos.
16. Baño rápido con agua corriente.
17. Baño rápido con agua acética 1%.
18. Baño rápido con agua corriente.
19. Baño rápido en etanol 70%, 6 sacudidas.
20. Baño rápido en etanol 80%, 8 sacudidas.
21. Baño rápido en etanol 96%, 10 sacudidas.
22. Baño en etanol 100%, 5 minutos.
23. Se acaba en xilol, en 2 o 3 cubetas, de 30 segundos a 5 minutos.
24. Montar de manera habitual.